Бактеріологічний посів (бакпосев)
Бактеріологічний посів (бакпосев) Зміст
Бакпосів
При виділенні певних мікроорганізмів проводиться другий немаловажний аналіз - антибіотикограма - Визначення чутливості виявлених патогенів до антибактеріальних препаратів і бактеріофагів.
Перевагами бактеріологічного посіву є:
• Висока специфічність методу (тобто перехресних помилкових реакцій не спостерігається).
• Можливість досліджувати абсолютно будь-яку біологічну рідину людини.
• Лікувальна мета - визначення чутливості виявленого мікроба до того чи іншого лікувального засобу (антибіотикограма), що дозволяє з досить високою точністю проводити лікувальні призначення.
Недоліки бактеріологічного посіву:
• Тривалість отримання результату.
• Високі вимоги до забору матеріалу.
• Певні вимоги до кваліфікації персоналу бактеріологічних лабораторій.
Показання для проведення бактеріологічного дослідження
Застосування мікробіологічного методу дослідження досить широко поширене в медичній практиці, зокрема, в інфекційних хворобах, гінекології, урології, хірургії, отоларингології, онкології та інших. Безумовним показанням для необхідності проведення бакпосева є будь запальне захворювання органів і систем організму людини, підозра на септичний процес.
Матеріал для бакпосева
Для дослідження забираються такі біологічні середовища організму людини: носоглоткова слиз, слиз із зіву, секрет бронхіального дерева (мокрота), випорожнення (кал), слиз уретри, цервікального каналу, секрет простати, сеча, кров, спинномозкова рідина, грудне молоко, жовч, вміст кіст, запальних вогнищ, ранові відокремлюване.
Баклабораторія
Які мікроорганізми можна виявити при бакпосева
У слизу носа і зіву можна виявити гемолітичні стрептококи (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae), пневмококи (Streptococcuc pneumoniae), золотистий стафілокок (Staphylococcus auereus), корінобактеріі дифтерії (Corynebacterium diphtheriae), гемофільної палички (Haemophilus influenzae типу b), менінгокок (Neisseria meningitidis ), лістерії (Listeria).
У випорожненнях намагаються виявити кишкову групу бактерій - салмонелли і шигели (Salmonella spp., Shigella spp.) Ієрсинії (Iersiniae spp.), Тифо-паратифозную групу бактерій (Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B), умовно - патогенні збудники кишкових інфекцій, анаеробні мікроби, збудників харчових токсикоінфекцій, а також обстежувати кал на дисбактеріоз кишечника.
У вмісті ран, біопунктате, гнійному виділеннях можна виявити псевдомонади або синьогнійну паличку (Pseudomonas aeruginosa).
Слиз урогенітального тракту обстежують на предмет наявності в ній збудників інфекцій, що передаються статевим шляхом - гонокока, трихомонади, грибів (Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis, гриби роду Candida), уреаплазму (Ureaplasma urealyticum), мікоплазму (Mycoplasma hominis), лістерії (Listeria), також можна досліджувати мазок на бактеріальну флору.
Кров можна посіяти (обстежити) на стерильність.
Такі матеріали, як грудне молоко, сеча, секрет простати, зішкріб, мазок, раневое вміст, суглобова рідина, жовч досліджують на загальну забрудненість (бактеріальну флору).
Що являє собою бактеріологічний посів?
Матеріал для дослідження в бактеріологічній лабораторії поміщають (роблять посів) на спеціальні живильні середовища. Залежно від бажаного пошуку того чи іншого збудника або групи збудників посів проводиться на різні середовища. Наприклад, це може бути виборча або елективна живильне середовище (для зростання якогось одного збудника, зростання інших мікробів при цьому пригнічується), прикладом яких може бути згорнута кінська сироватка для виявлення збудників дифтерії або середу з селенітом або з солями жовчних кислот для виявлення кишкових збудників.
Іншим прикладом можуть бути диференційно-діагностичні середовища (середа Гіссен), які використовуються для розшифровки бактеріальних культур. При необхідності з рідких поживних середовищ роблять пересівши на тверді середовища з метою більшої ідентифікації колоній.
Бакпосів. Колонії на твердому середовищі
Потім живильні середовища поміщають у термостат (спеціальний прилад), в якому створюються сприятливі умови (температура, вологість і ін.) Для росту і розмноження збудників, в термостаті середовища знаходяться певний час.
Далі проводять контрольний огляд вирослих колоній мікроорганізмів, які називають «культурою мікроорганізмів». При необхідності проводять мікроскопію матеріалу колоній з попередньою забарвленням спеціальними барвниками.
Що оцінюється при контрольному огляді? Це форма, колір, щільність колоній, після додаткового дослідження - здатність розкладати деякі неорганічні і органічні сполуки.
Далі проводять підрахунок збудників. При мікробіологічної дослідженні враховується таке поняття, як колонієутворюючих одиниць (КУО) - один мікробна клітина, здатна утворити колонію, або видима колонія мікробів. За КУО можливо визначити концентрацію або кількість мікроорганізмів у досліджуваному зразку. Підрахунок КУО проводиться різними методами: підрахунком колоній під мікроскопом, методом серійних розведень, секторних методом.
Правила забору біологічного матеріалу для бактеріологічного посіву
Якість проведеного бактеріологічного посіву в чому залежить від правильності забору матеріалу для дослідження. Потрібно пам'ятати просте правило: стерильна посуд і стерильні інструменти! Недотримання цих вимог призведе до контамінації (зовнішньої обсіменіння матеріалу представниками шкіри і слизових, навколишнього середовища, що не мають клінічного значення), що автоматично зробить дослідження безглуздим. Для забору матеріалу використовують стерильний посуд, яка видається в самій бактеріологічної лабораторії на руки пацієнту при амбулаторному обстеженні, для забору випорожнень, сечі. З різних вогнищ запалення паркан проводиться тільки стерильними інструментами (шпателі, петлі, ложки) спеціально навченим медичним працівником (в поліклініці зазвичай це медсестра інфекційного або оглядового кабінетів).
Кров і сечу збирають сухі пробірки, решта матеріали в посуд з транспортною живильним середовищем.
Стерильна посуд для забору сечі і випорожнень
Інше правило: забір матеріалу до початку антибіотикотерапії! На тлі прийому антибіотиків результат буде істотно спотворений. Якщо приймали такі препарати, то припинити їх прийом за 10 днів до дослідження і повідомити лікаря про факт прийому будь-яких антибактеріальних препаратів.
Повинна бути забезпечена швидка доставка в лабораторію! Мікроорганізми можуть загинути при висиханні, зміні кислотності. Наприклад, кал повинен бути доставлений в теплому вигляді.
При заборі сечі: після ранкових гігієнічних процедур забирається середня порція ранкової сечі в кількості 10-15 мл в стерильний посуд. Доставити в лабораторію протягом 2х годин.
При заборі мазка із зіву і носа: не можна вранці чистити зуби, полоскати рот і ніс дезінфікуючими розчинами, пити і їсти.
Забір випорожнень повинен проводитися вранці стерильною лопаткою в стерильний посуд в обсязі 15-30 гр. Неприпустимо попадання в пробу сечі. Доставка протягом 5:00. Не допускається заморожування або нічний зберігання. Збирати кал без застосування клізм і проносних.
Кров для бакпосева береться до початку антибіотикотерапії на тлі підйому температури в стерильну пробірку в кількості не менше 5 мл (дітям), не менше 15 мл (дорослим).
Мокрота збирається вранці натщесерце в стерильний контейнер під час нападу кашлю зі слизом. Перед забором почистити зуби і прополоскати рот кип'яченою водою. Доставити в лабораторію протягом 1:00.
Грудне молоко збирається після гігієнічної процедури. Навколососковому область обробляється тампоном, змоченим 70% етиловим спиртом. Перші 15 мл зцідженого молока не використовуються. Потім 5 мл зціджується в стерильний контейнер. Доставити протягом 2х годин.
Отделяемое статевих органів: у жінок паркан проводиться не раніше, ніж через 14 днів після менструації, не раніше ніж через 1 місяць після відміни антибіотиків, бажано протягом 2х годин не мочіться- у чоловіків - не рекомендується мочитися протягом 5-6 годин до взяття проби.
Терміни готовності бактеріологічного посіву
При дослідженні слизу з носоглотки результат буде готовий через 5-7 днів, дослідження випорожнень займе близько 4-7 днів. При обстеженні зіскрібка урогенітального тракту тривалість дослідження займають 7 днів. Посів на загальну флору триває 4-7 днів. Найбільше по тривалості готується кров на стерильність - 10 днів. Однак найраніший попередній результат можуть дати через 3 дні.
Результат бактеріологічного дослідження
Результатом бакпосева є як якісна оцінка (сам факт наявності збудника в досліджуваному зразку), так і кількісна оцінка (концентрація збудника в матеріалі).
Розшифровка кількісного результату проводиться найпростішим способом. Виділяють 4 ступеня росту (обсіменіння) мікроорганізмів в досліджуваному матеріалі. Для 1 ступеня зростання характерний убогий зростання тільки на рідкому середовищі, на твердій - зростання ні- для 2 ступеня - зростання на щільному середовищі до 10 колоній одного виду- для 3 ступеня - від 10 до 100 колоній- для 4 ступеня - більше 100 колоній.
Це важливо для умовно-патогенної флори, при виявленні якої 1 і 2 ступінь не вважають причиною хвороби, це просто свідчить про забрудненості матеріалу для дослідження, 3-4 ступеня вказують на етіологію (причину) захворювання. Якщо виділена патогенна флора, то враховуються всі без винятку виділені колонії, тобто всі 4 ступеня.
Результат підрахунку колоній в КУО / мл розшифровується таким чином: 103 / мл означає виявлення 1 колонії-104 / мл - від 1 до 5 колоній- 105 / мл - зростання 5-15 колоній- 106 / мл - більше 15.
Кількісний результат важливий не тільки для визначення ступеня обсіменіння, а й контролю правильності проведеного лікування.
Антибіотикограма
Визначення чутливості виділеного мікроорганізму до того чи іншого антибактеріальних препаратів є важливою складовою бактеріологічного дослідження. Набір препаратів, до якого чутливий або резистентний збудник, і є антибіотикограмою.
Антибіотикограма
Чутливість збудника - це сприйнятливість до лікарського препарату, тобто антибіотик подіє на ріст і розмноження мікроба. Резистентність - стійкість збудника до того чи іншого препарату, тобто антибактеріальний препарат не подіє.
Антибіотикограма видається в певних одиницях виміру - мінімальної концентрації (МІК).
Лікар інфекціоніст Бикова Н.І.
