Аналіз ПЦР

Аналіз крові на ПЛР - це найбільш сучасний метод лабораторного дослідження допомагає виявити збудники багатьох інфекційних хвороб. Трибуквений варіант - це скорочена абревіатура означає «полімеразна ланцюгова реакція». Саме ця назва методу і відображає його суть. Пропонуємо розібратися більш детально, що ж являє собою ПЛР-діагностика і в яких випадках вона застосовується?

Принцип роботи

Суть методу аналізу ПЛР полягає в розпізнаванні збудників інфекційних патологій шляхом визначення їх генетичного матеріалу (ДНК або РНК) в пробах, узятих у пацієнта. Під час дослідження зразок біологічного матеріалу, в якому імовірно знаходяться ДНК мікроорганізмів, поміщають у спеціальний реактор. Далі до цього зразком додають спеціальні ферменти, які забезпечують зв'язок з ДНК збудника захворювання і які здатні синтезувати його копію. Останній процес відбувається за принципом ланцюгової реакції в два етапи: на першому з однієї молекули ДНК утворюються дві нові молекули, а на другому з цих двох молекул утворюються чотири нові, і т.д. По закінченні декількох циклів реакції синтезу з однієї копії ДНК формуються кілька сотень або навіть тисяч копій. Отримане кількість копій ДНК збудника інфекції можна з легкістю перевірити і порівняти з базою даних, що містить інформацію про структуру ДНК різних мікроорганізмів.

Матеріалом для виконання аналізу методом ПЛР може служити:

• Сироватка крові, плазма, кров.
• Слиз та інші біологічні виділення.
• Сеча (необхідна перша порція сечі зібрана вранці).
• Зішкріб епітеліальних клітин (з уретри у жінок і у чоловіків, а також з цервікального каналу).
• Мокрота.
• Біологічні рідини (суглобова, плевральна, околоплодная, спинномозкова рідини, сік простати, слина).
• Біопатов дванадцятипалої кишки і шлунка.

За допомогою аналізу крові на ПЛР можна діагностувати безліч інфекцій: хелікобактеріоз, гепатит B, C, ВІЛ (СНІД), герпесний інфекцію, туберкульоз, папіломавірусну інфекцію, бактеріальний вагіноз, трихомоніаз, мікоплазмоз, кандидоз, хламідіоз, уреаплазмоз.

Гідності аналізу методом ПЛР

Безумовно, одне з основних достоїнств методу - це його універсальність. Аналіз ПЦР допомагає виявляти будь РНК і ДНК, навіть якщо інші методи залишаються безсилими. Причому обладнання, за допомогою якого проводиться дослідження стандартно і абсолютно не залежить від того, де саме і що конкретно потрібно знайти.

Ще одна перевага - висока специфічність (досягає 100%). У зразку, направленому на аналіз, розпізнається унікальна послідовність нуклеотидів, типова лише для конкретного збудника. Крім того, метод ПЛР характеризується високою чутливістю - можна виявити всього одну частину генетичного матеріалу збудника.

Також за допомогою аналізу ПЛР визначають наявність самого мікроорганізму, а не реакцію організму на його впровадження. Таким чином, ще в інкубаційному періоді, коли ніяких лабораторних або клінічних симптомів хвороби не відзначається, з'являється можливість безпомилково діагностувати захворювання.

Безсумнівна перевага аналізу крові на ПЛР - оперативність. Постановка реакції триває всього кілька годин, завдяки чому всі дослідження, з моменту здачі матеріалу до отримання результату, займає всього один день.

Недоліки аналізу крові на ПЛР

Природно ПЛР - не ідеальний метод, він має і деякі недоліки. Він досить високотехнологичен і вимагає дотримання строгих правил оснащення лабораторії. Так, наприклад, в приміщенні обов'язково повинен бути встановлений спеціальний фільтр біологічної очистки. Це пояснюється тим, що в повітрі постійно знаходиться неймовірний коктейль з частинок ДНК різних живих організмів, і під час підготовки до виконання реакції зразок матеріалу може бути забруднений, а це, у свою чергу, стане причиною «помилкового спрацьовування».

Ще один недолік - це негативний результат ПЛР-діагностики навіть за наявності яскраво вираженої клінічної картини. Причиною такого явища може бути неправильно взятий матеріал для дослідження. Зразок повинен брати тільки кваліфікований лікар, слідуючи всім необхідним інструкціям, які йому виписує лабораторія.

Оцінювати результати аналізу ПЛР також повинен фахівець, який призначає лікування конкретному пацієнту. Справа в тому, що позитивна відповідь ПЛР далеко не завжди означає наявність патології. Приміром, хворий пролікувався від якої-небудь хвороби, проте захисна система організму буде ще деякий час «розбирати на запчастини» загиблий збудник. Якщо в цей період зробити ПЛР-діагностику - результат виявиться позитивним.

Коли слід робити аналіз ПЦР?

Фахівці рекомендують проводити дане дослідження в наступних випадках: дискомфорт при сечовипусканні, різко змінився запах і відчуття печіння в статевих органах, свербіж, виділення, незвичайний характер виділень (консистенція, кількість, колір), випадковий статевий контакт без використання презерватива.

Також дуже важливо зробити аналіз ПЦР при вагітності, щоб вчасно виявити і провести лікування можливого захворювання, тим самим запобігши розвиток серйозних ускладнень. Даний аналіз здають в обов'язковому порядку жінки, в чиїх мазках присутня велика кількість лейкоцитів і які робили аборти. Найчастіше, аналіз ПЦР при вагітності проводять під час постановки на облік. Оскільки ця процедура робиться не у всіх лабораторіях і жіночих консультаціях, то лікар може виписати направлення в приватну клініку.

Безумовно, аналіз ПЦР - ефективний і потужний діагностичний інструмент, що допомагає швидко і точно виявити збудників багатьох інфекцій. Як правило, його застосовують для діагностики саме хвороб, що передаються статевим шляхом. У кожному разі обмежуватися лише одним методом можна. Бажано комбінувати різні способи діагностики - окрім визначення самого збудника аналізом ПЛР слід враховувати і імунну відповідь організму (визначається серологічними методами дослідження).